(hiv)艾滋病病毒初篩實驗室標本管理制度
(一)、樣品的采集和處理
艾滋病檢測最常用的樣品是血液,包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時也可作為測試樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下:
1、血清樣品采集和處理
(1)、用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量靜脈血,室溫下自然放置12h,待血液凝固、血塊收縮后再用3000r/min離心15min,吸出血清備用。
(2)、如用濾紙片采樣,則手指或耳垂局部嚴格按常規(guī)進行消毒,在刺破皮膚后,迅速把濾紙片沾上,切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。
2、抗凝血樣品采集和處理
(1)、用加有抗凝劑的真空采血管(或一次性注射器抽取靜脈血,轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管),反復(fù)輕搖,分離血漿和血細胞備用。
(2)、應(yīng)根據(jù)實驗要求選用適當?shù)目鼓齽?如cd4+/cd8+t淋巴細胞測定可選用k3edta或肝素或枸櫞酸鈉,hiv病毒分離、核酸定性/定量檢測可選用k3edta或枸櫞酸鈉。
(3)、用于核酸定性檢測時,采集的抗凝全血應(yīng)在4~8h內(nèi)分離pbmc和血漿,否則應(yīng)在24~48h內(nèi)分離血漿和血細胞。
3、采集樣品注意事項
(1)、采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。
(2)、采集樣品時應(yīng)注意安全,建議采用真空采血管及蝶形針具,以避免直接接觸血液;直接接觸hiv感染者/艾滋病(aids)病人血液/體液的操作,應(yīng)戴雙層手套。
(3)、所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品,均應(yīng)視為有潛在傳染性,都應(yīng)以安全的方式進行操作。
(4)、應(yīng)象操作未知傳染風險樣品一樣,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進行消毒。
(5)、采血時一定要注意安全,采血用一次性注射器,謹慎操作,防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。
(6)、離心機要使用密閉的罐和密封頭,以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。
(二)樣品的保存
1、用于抗體檢測的血清或血漿樣品,應(yīng)存放于-20℃以下,短期(1周)內(nèi)進行檢測的樣品可存放于2-8℃。
2、用于抗原和核酸檢測的血漿和血細胞樣品應(yīng)凍存于-20℃以下,進行病毒rna檢測的樣品如需保存3個月以上應(yīng)置于-80℃。
3、用于cd4+/cd8+t淋巴細胞測定的樣品不能長期保存,樣品采集時間超過48h則不可檢測。
(三)樣品的運送
1、實驗室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿,除特殊情況外一般不運送全血。
2、應(yīng)采用who提出的三級包裝系統(tǒng):
第一層容器:裝樣品,要求防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi),試管上應(yīng)有明顯的標記,標明樣品的編號或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料,以免碰碎。隨樣品應(yīng)附有送檢單,送檢單應(yīng)與樣品分開放置。
第二層容器:要求耐受性好、防滲漏、容納并保護第一層容器,可以裝若干個第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理。
第三層容器:放在一個運輸用外層包裝內(nèi),應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面要貼標簽(數(shù)量,收、發(fā)件人)。
3、血清和血漿樣品應(yīng)在2~8℃條件下由專人運送。用于cd4+/cd8+t淋巴細胞測定的樣品應(yīng)在室溫下18~23℃運送。每一包裝的體積以不超過50ml為宜。
4、運送感染性材料必須有記錄。
5、如分離血漿仍有困難,可直接將抗凝血-20℃以下凍存,采用冰壺冷藏運輸,避免凍融。
6、特殊情況下如需對個別樣品進行復(fù)測,可以用特快專遞形式投寄,但必須按三級包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好,避免使用玻璃容器,以保證不會破碎和溢漏。
(四)樣品的接收
1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓的、穿戴防護衣的工作人員打開,用后的包裹應(yīng)進行消毒。
2、核對樣品與送檢單,認真核對標本上病人姓名、年齡、性別、病區(qū)、床號、住院號是否與申請單符合。檢查樣品管有無破損和溢漏,如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出,對樣品管和盛器消毒,同時報告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。
3、檢查樣品的狀況,觀察標本的量、標本類型、是否抗凝或有小凝塊樣品,記錄有無嚴重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況,判斷標本是否符合檢驗要求。如果污染過重或者認為樣品不能被接受,則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。
4、打開標本容器時要小心,以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時若內(nèi)容物有可能濺出,則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進行。同時應(yīng)戴口罩、防護眼鏡,以防皮膚或粘膜污染。
5、因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。
6、接收樣品時應(yīng)規(guī)范填寫樣品接收單。
7、不符要求的標本,必須及時填寫退回理由單,及時通知送樣人,說明情況,重新留取。不符要求的標本與可疑含有感染性樣品用后的包裹同檢驗后的標本一樣進行消毒或無害化處理后廢棄。
(五)標本檢測
1、離心機要使用密閉的罐和密封頭,以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。復(fù)核標本接收過程中的每一步驟,在檢測過程中,應(yīng)嚴格按照標準化操作規(guī)程。
2、在標本足夠的情況下,不能浪費、隨意丟棄或損壞標本。應(yīng)象操作未知傳染風險樣品一樣,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進行消毒
(六)、標本處理
檢驗標本先用含2-3g/l有效氯消毒劑浸泡半小時,再用高壓鍋高壓消毒。然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一焚化處理。并做好登記。
